Základné požiadavky na odber vzoriek
1. Vzorky hospitalizovaných prípadov odoberá zdravotnícky personál nemocnice, v ktorej sa nachádzajú, a vzorky blízkych kontaktov odoberá miestna určená agentúra na kontrolu chorôb a zdravotnícke zariadenie. Pri odbere vzoriek by sa mali nastaviť rôzne oblasti odberu podľa rôznych zbierkových predmetov. Pacienti s horúčkou chodia do ambulancií pre liečbu a odber vzoriek. Inštitúcie, ktoré nemajú kliniky pre horúčku, by mali zriadiť špeciálne priestory na odber vzoriek pre pacientov s horúčkou a odoberať pacientov s horúčkou a iné testovacie skupiny, aby sa vyhli križovatkám. infekcia. 2. Asymptomaticky infikované osoby, vstupný personál a blízki ľudia by mali počas izolácie a pozorovania odoberať nazofaryngeálne výtery na testovanie nukleových kyselín. Po uvoľnení izolácie by sa mali súčasne odobrať dve vzorky nazofaryngeálnych výterov a na testovanie by sa mali použiť rôzne reagencie na detekciu nukleových kyselín. Sekundárne testovanie v zásade vykonávajú rôzne testovacie inštitúcie. 3. Podľa potreby klinického a laboratórneho testovania je možné počas hospitalizácie a izolácie odobrať viacero vzoriek a súčasne odobrať viacero vzoriek, ako sú dýchacie cesty, krv a stolica. Personál odberu vzoriek by mal pri odbere vzoriek prísne dodržiavať špecifikácie odberu vzoriek, aby sa zabezpečilo, že kvalita odobratých vzoriek spĺňa požiadavky. Zároveň by mali podrobne zaznamenávať informácie o skúšanom a na zber relevantných informácií môžu využívať skenovanie čiarových kódov a iné informačné metódy. 4. Na skríning populácie by sa mali skúmavky na odber vzoriek určiť podľa požiadaviek reagencií používaných na extrakciu a detekciu nukleových kyselín a môžu sa vybrať skúmavky na odber vzoriek obsahujúce činidlá inaktivujúce vírusy (guanidínové soli alebo povrchovo aktívne látky atď.). Vzorka použitá na izoláciu vírusu by sa mala umiestniť do skúmavky na odber vzoriek, ktorá neobsahuje činidlo na inaktiváciu vírusu. 5. Monitorovanie položiek a životného prostredia by malo byť založené na monitorovacích účeloch a potrebách prevencie a kontroly, aby sa určili položky odberu vzoriek, umiestnenie a množstvo, odber vzoriek by sa mal prísne riadiť špecifikáciami odberu vzoriek.
(4) Typy odobratých vzoriek. V každom prípade sa musia odobrať vzorky akútnych dýchacích ciest (vrátane vzoriek z horných dýchacích ciest alebo vzoriek z dolných dýchacích ciest). V závažných prípadoch sa najskôr odoberú vzorky z dolných dýchacích ciest; vzorky stolice, vzorky plnej krvi, vzorky séra a vzorky stolice sa môžu odoberať podľa klinických potrieb. Vzorka moču. Predmety a environmentálne vzorky sa zbierajú podľa požiadaviek monitorovania.
Typy vzoriek: 1. Vzorky z horných dýchacích ciest: vrátane výterov z nosohltanu, výteru z hrdla atď. tampóny: treba odobrať asi 10 gramov (veľkosť arašidov). Ak nie je vhodné uchovávať vzorky stolice, môžu sa odobrať análne tampóny. 4. Vzorka krvi: antikoagulačná krv, odberový objem je 5ml, na odber krvi sa odporúča použiť vákuovú cievku s obsahom EDTA antikoagulantu. 5. Vzorky séra: skúste odobrať dvojité vzorky séra počas akútnej fázy a fázy zotavenia. Prvé sérum by sa malo odobrať čo najskôr (najlepšie do 7 dní po nástupe ochorenia) a druhé sérum by sa malo odobrať do 3 až 4 týždňov po nástupe ochorenia. Objem odberu je 5 ml a odporúča sa použiť vákuovú odberovú skúmavku krvi bez antikoagulantu. Vzorky séra sa používajú hlavne na stanovenie protilátok a nie na detekciu nukleových kyselín. 6. Vzorka moču: odoberte ranný moč, objem odberu je 2~3 ml. 7. Povrchové exempláre: vrátane dovezených potravín s chladiacim reťazcom alebo dovezeného tovaru na vnútorných a vonkajších obalových povrchoch, ako aj prepravných a skladovacích nástrojov a iných častí, ktoré môžu byť kontaminované zberom škvŕn. 8. Vzorky odpadových vôd: Podľa distribúcie drenážneho systému veľkokapacitných dovážaných miest na spracovanie a úpravu mrazeného tovaru v námornom prístave sa zamerajte na výber odtoku odpadových vôd, zberu vnútornej potrubnej siete, po prúde odpadových vôd alebo spojenie s mestskou potrubnou sieťou atď. 2 až 3 body Vzorky bitov sa odoberajú.
(4) Odber a spracovanie vzoriek
1. Výter z nosohltanu: vzorkovač jednou rukou jemne podopiera hlavu osoby, ktorej sa má odobrať, a druhou rukou drží výter. Tampón vstupuje do nosovej dierky a pomaly prechádza hlboko po dne dolného nosového priechodu. Pretože nosový priechod je zakrivený, nie je prípustný. Nadmerná sila, aby sa zabránilo traumatickému krvácaniu. Keď hrot tampónu dosiahne zadnú stenu nosohltanovej dutiny, týždeň ním jemne otáčajte (v prípade reflexného kašľa chvíľu zostaňte), potom tampón pomaly vyberte a hlavu tampónu ponorte do 2～3 ml. vírusový konzervačný roztok (môže byť aj Použite izotonický fyziologický roztok, tekutinu z tkanivovej kultúry alebo fosfátový pufor), zlikvidujte chvost a pevne zaskrutkujte uzáver.
2. Faryngeálny tampón: odoberaná osoba by si mala vypláchnuť ústa normálnym fyziologickým roztokom a osoba, ktorá odoberá vzorky, navlhčí tampón v sterilnom fyziologickom roztoku (je zakázané vkladať tampón do roztoku na konzerváciu vírusov, aby antibiotiká nespôsobili alergie) a zbieraná osoba Mierne nakloňte hlavu, otvorte ústa a urobte"ah" zvuk, obnažte mandle na oboch stranách, priložte tampón cez spodinu jazyka, utrite mandle na oboch stranách osoby malou silou aspoň 3-krát a potom utierajte hore a dole zadný hltan aspoň po dobu 3 krát. Potom ponorte hlavicu tampónu do skúmavky obsahujúcej 2 až 3 ml roztoku na ochranu vírusu (môže sa použiť aj izotonický fyziologický roztok, tekutina z tkanivovej kultúry alebo roztok fosfátového pufra), zlikvidujte chvost a pevne zaskrutkujte uzáver skúmavky. Tampón z hrdla môže byť tiež umiestnený do rovnakej skúmavky ako tampón z nosohltanu.
3. Extrakt z nosohltanu alebo extrakt z dýchacích ciest: Použite zberač pripojený k podtlakovej pumpe na extrakciu hlienu z nosohltanu alebo extrahovanie respiračných sekrétov z priedušnice. Vložte hlavicu zberača do nosovej dutiny alebo priedušnice, zapnite podtlak, otáčajte hlavicu zberača a pomaly vyťahujte, pozbierajte extrahovaný hlien a zberač raz vypláchnite 3ml odberovej tekutiny (môžete použiť aj pediatrickú katéter pripojený k 50 ml injekčnej striekačke Alternatívny zberač).
4. Hlboký spút z hlbokého kašľa: Potom, čo pacient hlboko kašľa, zachyťte vykašľaný spút do odberovej skúmavky obsahujúcej 3 ml tekutiny na odber vzoriek. Ak sa spúta nezhromažďuje v tekutine na odber vzoriek, pred testom možno pridať 2 až 3 ml tekutiny na odber vzoriek alebo je možné pridať rovnaký objem tráviacej šťavy zo spúta. Vzorec roztoku na uchovávanie tráviacej šťavy v spúte je uvedený v tabuľke 1.
Pri použití zrieďte skladovací roztok na 50 ml deionizovanou vodou, zmiešajte ho s rovnakým objemom spúta alebo si pozrite návod na použitie činidla, alebo použite rovnaký objem spúta s 1 g/l fosfátového pufra s obsahom proteinázy K na konverziu spúta.
5. Kvapalina na výplach priedušiek: vložte hlavicu zberača z nosovej dierky alebo tracheálneho hrdla do priedušnice (asi 30 cm hlboko), vstreknite 5 ml normálneho fyziologického roztoku, zapnite podtlak, otáčajte hlavicu zberača a pomaly vytiahnite, zbierajte extrahovaný hlien, A raz prepláchnite zberač vzorkovým roztokom, alebo môžete použiť detský katéter pripojený k 50 ml injekčnej striekačke, aby ste nahradili odber.
6. Alveolárna výplachová tekutina: Po lokálnej anestézii zaveďte fibrooptický bronchoskop cez ústa alebo nos cez hltan do bronchu pravého stredného laloku alebo ľavého pľúcneho lingválneho segmentu a poklepte jeho hornou časťou do otvoru vetvy priedušiek a pomaly ho pridajte cez tracheálny bioptický otvor. Bakteriálny fyziologický roztok, zakaždým 30-50 ml, celkovo 100-250 ml, by nemal presiahnuť 300 ml.
7. Vzorka stolice: Vezmite 1 ml roztoku na spracovanie vzorky, odoberte vzorku stolice veľkosti sójových bôbov a pridajte ju do skúmavky, jemne prefúknite a odsajte 3 až 5-krát, nechajte 10 minút stáť pri izbovej teplote, odstreďte pri 8000 rpm počas 5 minút a absorbujte supernatant. Detekcia. Roztok na ošetrenie vzorky stolice sa môže pripraviť samostatne a vzorec je uvedený v tabuľke 2.
Na rozpustenie vzorky stolice na prípravu suspenzie stolice možno použiť aj roztok HANK'S alebo iný izotonický fyziologický roztok, tekutinu z tkanivovej kultúry alebo roztok fosfátového pufra. Ak má pacient príznaky hnačky, odoberte 3 ~ 5 ml vzorky stolice, jemne premiešajte pipetou, centrifugujte pri 8000 ot./min. počas 5 minút a absorbujte supernatant na použitie.
8. Análny tampón: Použite sterilný vatový tampón na jemné zasunutie do konečníka 3–5 cm, potom ho jemne otočte, ihneď vložte do 15 ml skúmavky na odber vzoriek s vonkajším skrutkovacím uzáverom obsahujúcej 3–5 ml roztoku na ochranu vírusov, chvost zlikvidujte, a otočte ho. Utiahnite uzáver trubice.
9. Vzorky krvi: Na odber 5 ml vzoriek krvi sa odporúča použiť vákuové skúmavky na odber krvi s antikoagulantom EDTA. Podľa typu vybraných činidiel na extrakciu nukleových kyselín použite na extrakciu nukleovej kyseliny plnú krv alebo plazmu. Na oddelenie plazmy odstreďujte celú krv pri 1500-2000 otáčkach za minútu počas 10 minút a supernatant zozbierajte do sterilnej plastovej skúmavky so skrutkovacím uzáverom.
10. Vzorka séra: Odoberte 5 ml vzorky krvi pomocou vákuovej podtlakovej skúmavky na odber krvi, nechajte ju pri izbovej teplote 30 minút, centrifugujte pri 1500-2000 ot./min. počas 10 minút a odoberte sérum do sterilnej plastovej skúmavky so skrutkovacím uzáverom.
11. Povrchové vzorky: Pozrite si metódu odporúčanú v"Technické špecifikácie pre environmentálne monitorovanie nového koronavírusu na trhu s poľnohospodárskym obchodom (trhový obchod)" (WS/T776—2021). Keď je vzorkovací tampón úplne infiltrovaný roztokom na ochranu vírusu, znova ho naneste na povrch a potom tampón. Vložte ju späť do odberovej skúmavky a namočte ju, vyberte ju a znova naneste vzorku, opakujte viac ako 3-krát. Viacbodové distribuované vzorkovanie sa vykonáva na objektoch s veľkými povrchmi.
12. Vzorky odpadových vôd: Pozrite si metódy odporúčané v"Technické špecifikácie pre environmentálne monitorovanie nového koronavírusu na trhu s poľnohospodárskym obchodom (trhový obchod)" (WS/T776—2021). Pri odbere tampónu vzorky odpadovej vody ponorte tampón do adsorbovanej odpadovej vody a vyberte tampón. Skúmavku na odber vzoriek vložte späť, aby sa namočila, vyberte ju a znova ponorte do odpadovej vody, opakujte viac ako 3-krát a vykonajte viacbodové distribuované vzorkovanie pre každé miesto odberu odpadových vôd. Pri odbere vzoriek odpadovej vody použite polyetylénové plastové fľaše na zachytenie 1 l až 1,5 l odpadovej vody. Na zber odpadových vôd s objemom väčším ako 1,5 l môžete použiť polyetylénové plastové vedrá alebo špeciálne zariadenie na obohacovanie vzoriek vody na mieste. Pred odberom vzoriek odpadovej vody by sa mali dôkladne premiešať a potom odobrať vzorky; ak sa odpadové vody ťažko dobre premiešavajú a dochádza k stratifikácii, odber vzoriek sa môže vykonávať vo vrstvách podľa podielu objemu vody v každej vrstve.
13. Ostatné materiály: zbierajte podľa konštrukčných požiadaviek a špecifikácií.
(5) Vzorový obal
Po odbere sa vzorky zabalia do biologickej bezpečnostnej skrinky laboratória biologickej bezpečnosti druhého stupňa.
1. Všetky vzorky by sa mali vložiť do skúmavky na odber vzoriek vhodnej veľkosti so skrutkovacím uzáverom a tesnením vo vnútri, ktorá je odolná voči mrazu, a utiahnuť. Číslo vzorky, typ, názov a dátum odberu sú uvedené na vonkajšej strane nádoby. 2. Vložte zapečatené vzorky do zapečateného vrecka, každé vrecko je obmedzené na jednu vzorku. Požiadavky na balenie vzoriek musia spĺňať príslušné normy"Technických pravidiel pre bezpečnú leteckú prepravu nebezpečného tovaru". 3. Ak ide o prepravu externých vzoriek, trojvrstvové balenie sa vykoná podľa typu vzoriek a infekčných látok triedy A alebo triedy B.
(6) Zachovanie exemplárov
Vzorky používané na izoláciu vírusu a detekciu nukleových kyselín by sa mali otestovať čo najskôr. Vzorky, ktoré je možné testovať do 24 hodín, možno skladovať pri teplote 4 °C; Vzorky, ktoré sa nedajú zistiť do 24 hodín, by sa mali uchovávať pri teplote -70 °C alebo nižšej (ak nie - Uchovávajte pri teplote 70 °C v chladničke pri teplote -20 °C). Vzorky séra je možné skladovať pri teplote 4 °C počas 3 dní a možno ich dlhodobo skladovať pod -20 °C. Mali by byť zriadené špeciálne knižnice alebo špeciálne počítadlá na samostatné uchovávanie vzoriek.
(7) Predložte vzorky na kontrolu
Vzorky by mali byť zaslané do laboratória čo najskôr po odbere a nemali by byť umiestnené pri izbovej teplote (25 °C) dlhšie ako 4 hodiny po odbere. Ak je potrebná preprava na dlhé vzdialenosti, odporúča sa na skladovanie použiť suchý ľad a iné spôsoby chladenia. Zabráňte opakovanému zmrazovaniu a rozmrazovaniu počas prepravy vzorky.
1. Pošlite vzorky
Všetky pôvodné alebo skoré prípady v miestnych epidémiách objavené v rôznych provinciách (autonómne regióny a obce), kľúčové prípady súvisiace s epidemiológiou prvých prípadov, lokálne prípady s neznámymi zdrojmi infekcie, importované prípady zo zahraničia, importovaný tovar a súvisiace environmentálne pozitívne vzorky atď. Paralelne by sa mali odobrať aspoň 2 vzorky, jedna sa pošle každej provinčnej agentúre na kontrolu chorôb na testovanie, druhá sa pošle do Čínskych centier pre kontrolu a prevenciu chorôb na testovanie a preskúmanie a formulár na predloženie vzorky je priložený (pozri prílohu 10-1). Nové reprezentatívne kmene izolované z rôznych provincií by mali byť urýchlene zaslané do Čínskych centier pre kontrolu a prevenciu chorôb na kontrolu a konzerváciu.
2. Transport vzoriek a kmeňov
(1) Vnútroštátna preprava nových kmeňov koronavírusov alebo iných potenciálne infekčných biologických materiálov je klasifikovaná ako trieda A a zodpovedajúce UN číslo je UN2814. Obal je v súlade s klasifikáciou PI620 dokumentu ICAO Doc9284"Technické pokyny pre bezpečnú leteckú prepravu nebezpečného tovaru" Požiadavky na balenie: Environmentálne vzorky patria do kategórie B a zodpovedajúce UN číslo je UN3373. Obal spĺňa požiadavky klasifikácie PI650 dokumentu ICAO Doc9284"Technické pravidlá pre bezpečnú prepravu nebezpečného tovaru letecky"; vyššie uvedené štandardné balenie možno použiť na prepravu inými dopravnými prostriedkami. Preprava nových kmeňov koronavírusov alebo iných potenciálne infekčných materiálov by sa mala vykonávať v súlade s"Administratívne predpisy o preprave vysoko patogénnych mikroorganizmov (vírusov) druhov alebo vzoriek, ktoré môžu infikovať ľudí" (predtým vyhláška Ministerstva zdravotníctva č. 45) pre"Osvedčenie o povolení na prepravu" .
(2) Medzinárodná preprava Vzorky alebo kmene nového koronavírusu, ktoré sa prepravujú medzinárodne, musia byť zabalené štandardizovaným spôsobom, musia prejsť príslušnými postupmi v súlade s"Nariadeniami o sanitárnej správe a karanténe vstupu a Ukončite kvótu špeciálnych článkov&a splňte príslušné národné a medzinárodné požiadavky.
(3) Príjem a správa vzoriek a kmeňov vírusov. Letecky prepravované exempláre prichádzajú na cieľové letisko a sú prepravované profesionálnymi dopravnými prostriedkami k prijímacej jednotke. Exempláre prepravované po súši sa prepravujú profesionálnymi vozidlami. Prepravcovia a príjemcovia sa pri prevzatí musia vysporiadať so vzormi Dvojitý znak. Vzorky a kmene nového koronavírusu by mala spravovať špecializovaná osoba, presne zaznamenávať zdroj, typ, množstvo a registráciu vzoriek a kmeňov, prijať účinné opatrenia na zaistenie bezpečnosti kmeňov a vzoriek a prísne predchádzať zneužitie, zneužitie, krádež a krádež. Lúpež, strata, únik a iné incidenty.
02
Laboratórne testy na nový koronavírus
