Ako používať fľaštičku na sérum na inaktiváciu séra

Mar 07, 2022 Zanechajte správu

fľaštička séra

Ako živina potrebná pre rast buniek je úloha séra v bunkovej kultúre zrejmá a kvalita a sterilita séra sú tiež kľúčom k určeniu úspechu experimentu. Ako teda deaktivovať sérum? Vyžaduje si to použitie fľaštičiek séra.

Kroky inaktivácie séra sú nasledovné:


1. Vyberte fľaštičku, ktorá je rovnaká ako fľaštička so sérom ako kontrolná fľaštička, do kontrolnej fľaštičky nalejte rovnaký objem destilovanej vody ako sérum a zmerajte teplotu.


2. Nastavenie teploty. Do fľaše kontrolnej skupiny vložte dva ortuťové teplomery a vložte ich do vodného kúpeľa. Keď teplomer ukazuje 56 stupňov, nastavte teplotu kalibračného vodného kúpeľa na 56 stupňov.


3. Fľaštičku so sérom a kontrolnú fľaštičku vložte spolu do vodného kúpeľa, upravte teplotu na 56 stupňov a kúpte sa vo vodnom kúpeli na pol hodiny. Po inaktivácii ich rozdeľte do fliaš, vykonajte aseptické experimenty a skladujte pri teplote -70--20 stupňov.


4. Pre pozorovanie farby a priehľadnosti zmrazeného séra, ak je farba červenkastá alebo je farba svetlejšia so zrážaním, znamená to, že kvalita séra nie je dobrá, preto je potrebné zvoliť kvalitné sérum na inaktiváciu .


5. Pri použití séra by sa malo vyhnúť opakovanému rozmrazovaniu, ktoré zvýši pravdepodobnosť kontaminácie séra a zníži kvalitu séra. Akonáhle sa opakovane rozmrazené sérum vyzráža, znamená to, že sérum je nedostupné alebo má extrémne nízku kvalitu.


6. Aby sa zaistila stabilita experimentálnych výsledkov, pri delení fľaštičky sa uistite, že sa sérum dobre pretrepe a potom fľaša rozdeľte a skúste použiť rovnaké sérum, aby sa zabezpečil princíp jednotných premenných.


Vyššie uvedené sú špecifické kroky inaktivácie séra pomocou sérových fliaš, ale stojí za zmienku, že vo väčšine bunkových kultúr nie je tepelná inaktivácia séra potrebná. V mnohých prípadoch tepelná inaktivácia nezlepšuje rast buniek, ale naopak ničí sérum a zvyšuje zrážanie. Pokiaľ literatúra neuvádza, že pre bunky sa musí použiť inaktivované sérum, krok tepelnej inaktivácie séra možno pri bunkovej kultúre vo všeobecnosti vynechať.