Ako používať sérovú fľašu na inaktiváciu séra
Ako živina potrebná pre rast buniek je úloha séra v bunkovej kultúre samozrejmá a kvalita a sterilita séra sú tiež kľúčom k určeniu úspechu experimentu. Ako deaktivovať sérum? To si vyžaduje použitie sérových fliaš.
Kroky inaktivácie séra sú nasledovné:
1. Vyberte fľašu, ktorá je rovnaká ako fľaša séra ako kontrolná fľaša, nalejte rovnaký objem destilovanej vody ako sérum do kontrolnej fľaše a zmerajte teplotu.
2. Nastavenie teploty. Vložte dva ortuťové teplomery do fľaše kontrolnej skupiny a umiestnite ich do vodného kúpeľa. Keď teplomer ukazuje 56 stupňov, nastavte teplotu kalibračného vodného kúpeľa na 56 stupňov.
3. Fľašu séra a kontrolnú fľašu poskladajte do vodného kúpeľa, nastavte teplotu na 56 stupňov a pol hodiny si vezmite vodný kúpeľ. Po inaktivácii ich rozdeľte na fľaše, robte aseptické experimenty a skladujte ich pri -70-20 stupňoch.
4. Ak chcete pozorovať farbu a priehľadnosť mrazeného séra, ak je farba načervenalá alebo farba je svetlejšia so zrážaním, znamená to, že kvalita séra nie je dobrá, takže je potrebné vybrať kvalitné sérum na inaktiváciu.
5. Použitie séra by sa malo zabrániť opakovanému rozmrazovaniu, čo zvýši pravdepodobnosť kontaminácie séra a zníži kvalitu séra. Akonáhle sa opakovane rozmrazené sérum vyzráža, znamená to, že sérum nie je k dispozícii alebo má nízku kvalitu.
6. Aby sa zabezpečila stabilita experimentálnych výsledkov, uistite sa, že sérum by sa malo pri delení fľaše dobre pretrepať a potom rozdeliť fľašu a pokúsiť sa použiť rovnaké sérum na zabezpečenie princípu jednotných premenných.
Vyššie uvedené sú špecifické kroky inaktivácie séra pomocou sérových fliaš, ale stojí za zmienku, že vo väčšine bunkových kultúr nie je potrebná tepelná inaktivácia séra. V mnohých prípadoch inaktivácia tepla nezlepšuje rast buniek, ale namiesto toho ničí sérum a zvyšuje zrážky. Pokiaľ literatúra nenaznačuje použitie inaktivovaného séra pre bunky, krok inaktivácie tepla v sére môže byť vo všeobecnosti vynechaný pre bunkovú kultúru.
